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Papain ist eine Art Protease, die Proteine in sauren, neutralen und alkalischen Umgebungen zersetzen kann.Sein Aussehen ist weißes bis hellgelbes Pulver, leicht hygroskopisch;Papain ist in Wasser und Glycerin löslich, und die wässrige Lösung ist farblos oder hellgelb, manchmal milchig weiß;Es ist in organischen Lösungsmitteln wie Ethanol, Chloroform und Ether nahezu unlöslich.
Papain ist eine Sulfhydryl (-SH) enthaltende Endopeptidase.Es hat die Aktivitäten von Protease und Esterase, es hat ein breites Spektrum an Spezifität und es hat eine starke Hydrolysefähigkeit gegenüber tierischen und pflanzlichen Proteinen, Polypeptiden, Estern, Amiden usw., kann aber Pepton kaum abbauen.
Das Rohprodukt wird aus der unreifen Frucht der Papaya durch Lotionextraktion, Koagulation, Sedimentation und Trocknung hergestellt.Im Allgemeinen ist die Anwendung von Rohprodukten die Hauptindustrie.Es gibt drei Herstellungsverfahren für Papainreim, nämlich direkte Heißlufttrocknung, Sprühtrocknung und Membranseparations-Gefriertrocknung.
1. Direkte Trocknung
Die Produktionsmethode ist einfach und schnell, aber das Endprodukt ist nur Rohenzym mit vielen Verunreinigungen, schlechter Farbe und Mikroorganismen, die den Standard übersteigen, und die Enzymaktivität ist gering, nur 600.000-800.000 Einheiten / g.Die meisten von ihnen werden von einzelnen Fabriken verwendet, die die inländischen Lebensmittelqualitäts-, Gesundheits- und Sicherheitsanforderungen nicht mehr erfüllen können.
2. Sprühtrocknung
Dieses Verfahren besteht darin, einige Verunreinigungen durch Zentrifugieren vor dem Sprühtrocknen zu entfernen.Die Enzymaktivität des Endprodukts ist relativ hoch und erreicht etwa 1 Million Einheiten/g, mit relativ wenigen Verunreinigungen und relativ weißer Farbe.Das Produkt neigt jedoch dazu, beim Sprühen an der Wand zu haften, was zu einem größeren Verlust an Enzymaktivität, einer relativ schlechten Wasserlöslichkeit und einer schlechten Stabilität der Enzymaktivität führt.
3. Membrantrennverfahren
Dieses Herstellungsverfahren vermeidet nicht nur die Nachteile der beiden oben genannten Verfahren, sondern weist auch einen hygienischen und sicheren Herstellungsprozess, eine hohe Ausbeute und einen geringen Verlust an Enzymaktivität des Endprodukts auf.Die Enzymaktivität kann im Allgemeinen 2,8 Millionen bis 3,5 Millionen Einheiten / g erreichen, bis zu 4 Millionen Einheiten / g, gute Stabilität der Enzymaktivität, hohe Reinheit, weiße Farbe, geringe Anzahl von Bakterien und strenger Betrieb können das pharmazeutische Niveau erreichen.
Die Extraktionsbedingungen waren wie folgt: Ultraschallleistung 300 W, Ultraschallbehandlungszeit 200 s, Fruchtmark-Massenanteil 30 %;Die Enzymaktivität stieg nach der Ultraschallextraktion auf das 1,71-fache der ursprünglichen an;Die Enzymaktivität war relativ stabil, wenn die Temperatur unter 40 ° C lag und der pH-Wert 5,4 bis 6,0 betrug;EDTA, Cys und Vitamin C können die Enzymaktivität aktivieren, CuS04 und ZnCl2 können sie hemmen, während KCl, NaCl, CaCl2 und MgS04 wenig Einfluss auf die Enzymaktivität haben.
Trenn- und Reinigungsverfahren von Papain: Papain wird von Papayamilch durch vorläufiges Sammeln und Behandlung, fraktionierte Fällung mit 20 % und 40 % Ammoniumsulfat, SP-Sephadex-C50-Säulenchromatographie und Hydroxyapatit-Säulenchromatographie getrennt und gereinigt.Das reine Enzym mit einer spezifischen Aktivität von 1184 U/mg kann erhalten werden, die Aktivitätsrückgewinnungsrate beträgt 55,79 % und die Reinheit 99,31 %, was ein hochreines Papain ist.
Papain wird häufig in der Medizin, in Lebensmitteln, Getränken, chemischen Reagenzien, Futtermitteln, Textilien und Kosmetika verwendet und hat breite Entwicklungsperspektiven.
1. Lebensmittelindustrie
In der Lebensmittelindustrie kann Papain zum Zartmachen von Fleisch, Klären von Bier, Lockern von Keksen und anderen Zwecken verwendet werden.
2. Wissenschaftliche Forschungsanwendung
Papain kann in Zellkulturexperimenten verwendet werden und wird verwendet, um Zellen im ersten Schritt der Herstellung von Zellkulturmedien zu trennen.Nach 10 Minuten Enzymbehandlung kann die extrazelluläre Matrix, die die Zellen verbindet, unterbrochen werden;Verwenden Sie dann einen Protease-Inhibitor, um die Reaktion zu stoppen und zu verhindern, dass Papain die Zelle selbst weiter knackt;Schließlich wurde der Gewebeblock mit einer Pasteurpipette in eine Einzelzellsuspension aufgebrochen.
In der Immunologie kann Papain verwendet werden, um das Fc-Segment (kristallisierbar) und das Fab-Segment (Antigenbindung) von Immunglobulin (Antikörper) zu schneiden.
Papain ist eine Art Protease, die Proteine in sauren, neutralen und alkalischen Umgebungen zersetzen kann.Sein Aussehen ist weißes bis hellgelbes Pulver, leicht hygroskopisch;Papain ist in Wasser und Glycerin löslich, und die wässrige Lösung ist farblos oder hellgelb, manchmal milchig weiß;Es ist in organischen Lösungsmitteln wie Ethanol, Chloroform und Ether nahezu unlöslich.
Papain ist eine Sulfhydryl (-SH) enthaltende Endopeptidase.Es hat die Aktivitäten von Protease und Esterase, es hat ein breites Spektrum an Spezifität und es hat eine starke Hydrolysefähigkeit gegenüber tierischen und pflanzlichen Proteinen, Polypeptiden, Estern, Amiden usw., kann aber Pepton kaum abbauen.
Das Rohprodukt wird aus der unreifen Frucht der Papaya durch Lotionextraktion, Koagulation, Sedimentation und Trocknung hergestellt.Im Allgemeinen ist die Anwendung von Rohprodukten die Hauptindustrie.Es gibt drei Herstellungsverfahren für Papainreim, nämlich direkte Heißlufttrocknung, Sprühtrocknung und Membranseparations-Gefriertrocknung.
1. Direkte Trocknung
Die Produktionsmethode ist einfach und schnell, aber das Endprodukt ist nur Rohenzym mit vielen Verunreinigungen, schlechter Farbe und Mikroorganismen, die den Standard übersteigen, und die Enzymaktivität ist gering, nur 600.000-800.000 Einheiten / g.Die meisten von ihnen werden von einzelnen Fabriken verwendet, die die inländischen Lebensmittelqualitäts-, Gesundheits- und Sicherheitsanforderungen nicht mehr erfüllen können.
2. Sprühtrocknung
Dieses Verfahren besteht darin, einige Verunreinigungen durch Zentrifugieren vor dem Sprühtrocknen zu entfernen.Die Enzymaktivität des Endprodukts ist relativ hoch und erreicht etwa 1 Million Einheiten/g, mit relativ wenigen Verunreinigungen und relativ weißer Farbe.Das Produkt neigt jedoch dazu, beim Sprühen an der Wand zu haften, was zu einem größeren Verlust an Enzymaktivität, einer relativ schlechten Wasserlöslichkeit und einer schlechten Stabilität der Enzymaktivität führt.
3. Membrantrennverfahren
Dieses Herstellungsverfahren vermeidet nicht nur die Nachteile der beiden oben genannten Verfahren, sondern weist auch einen hygienischen und sicheren Herstellungsprozess, eine hohe Ausbeute und einen geringen Verlust an Enzymaktivität des Endprodukts auf.Die Enzymaktivität kann im Allgemeinen 2,8 Millionen bis 3,5 Millionen Einheiten / g erreichen, bis zu 4 Millionen Einheiten / g, gute Stabilität der Enzymaktivität, hohe Reinheit, weiße Farbe, geringe Anzahl von Bakterien und strenger Betrieb können das pharmazeutische Niveau erreichen.
Die Extraktionsbedingungen waren wie folgt: Ultraschallleistung 300 W, Ultraschallbehandlungszeit 200 s, Fruchtmark-Massenanteil 30 %;Die Enzymaktivität stieg nach der Ultraschallextraktion auf das 1,71-fache der ursprünglichen an;Die Enzymaktivität war relativ stabil, wenn die Temperatur unter 40 ° C lag und der pH-Wert 5,4 bis 6,0 betrug;EDTA, Cys und Vitamin C können die Enzymaktivität aktivieren, CuS04 und ZnCl2 können sie hemmen, während KCl, NaCl, CaCl2 und MgS04 wenig Einfluss auf die Enzymaktivität haben.
Trenn- und Reinigungsverfahren von Papain: Papain wird von Papayamilch durch vorläufiges Sammeln und Behandlung, fraktionierte Fällung mit 20 % und 40 % Ammoniumsulfat, SP-Sephadex-C50-Säulenchromatographie und Hydroxyapatit-Säulenchromatographie getrennt und gereinigt.Das reine Enzym mit einer spezifischen Aktivität von 1184 U/mg kann erhalten werden, die Aktivitätsrückgewinnungsrate beträgt 55,79 % und die Reinheit 99,31 %, was ein hochreines Papain ist.
Papain wird häufig in der Medizin, in Lebensmitteln, Getränken, chemischen Reagenzien, Futtermitteln, Textilien und Kosmetika verwendet und hat breite Entwicklungsperspektiven.
1. Lebensmittelindustrie
In der Lebensmittelindustrie kann Papain zum Zartmachen von Fleisch, Klären von Bier, Lockern von Keksen und anderen Zwecken verwendet werden.
2. Wissenschaftliche Forschungsanwendung
Papain kann in Zellkulturexperimenten verwendet werden und wird verwendet, um Zellen im ersten Schritt der Herstellung von Zellkulturmedien zu trennen.Nach 10 Minuten Enzymbehandlung kann die extrazelluläre Matrix, die die Zellen verbindet, unterbrochen werden;Verwenden Sie dann einen Protease-Inhibitor, um die Reaktion zu stoppen und zu verhindern, dass Papain die Zelle selbst weiter knackt;Schließlich wurde der Gewebeblock mit einer Pasteurpipette in eine Einzelzellsuspension aufgebrochen.
In der Immunologie kann Papain verwendet werden, um das Fc-Segment (kristallisierbar) und das Fab-Segment (Antigenbindung) von Immunglobulin (Antikörper) zu schneiden.